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ENZO Life Sciences公司FluoForteTM Calcium Assay Kit推荐——高荧光强度、高灵敏性的

 

ENZO Life Sciences公司FluoForteTM Calcium Assay Kit推荐
      
——高荧光强度、高灵敏性的钙离子指示剂
 
 
 
试剂盒特征: 
    
      ENZO公司的FluoForteTM Calcium Assay Kit试剂盒提供一种基于荧光的检测分析,可广泛的用于生物靶向的钙动员检测。与市面上的其他染料相比,FluoForteTM 染料可提供更强的荧光信号和更大范围的检测窗(assay window)。该试剂盒提供均一的mix-and-read试剂,无需洗涤即可进行钙动员检测。该试剂盒操作简便,无需洗涤步骤,也不需加入外源萃灭剂(加入外源萃灭剂可能不利于受体与配体的相互作用)。
    不同于在高通量筛选中广泛使用的其他钙离子指示剂,FluoForte™染料提供优越的检测方法检测细胞系和受体;然而Fluo-3,Fluo-4荧光信号相对较弱,因此也限制了他们在这方面的应用。
 
图1: FluoForteTM用于高通量G蛋白偶联受体的激活检测(HTS GPCR Activation Assay)。FluoForteTM作为一种细胞膜通透性的乙酰甲酯(AM ester)进入胞内。当FluoForteTM进入细胞内后,即被胞内的酯酶水解,产生的FluoForte-带负电,不能透过细胞膜,此时与 Ca2+结合。有些细胞系表达有机阴离子转运蛋白,这可能引起带负电荷的FluoForte-被转运至胞外,这一问题可以通过加入转运蛋白的抑制剂Dye Efflux Inhibitor加以解决。

 
图2:从上图可见,FluoForte的荧光强度显著高于Fluo-4 AM和Fluo-3 AM。Hela细胞系40,000cell/100ul过夜培养于96孔板;去培养基,然后与100ul 4uM的Fluo-3AM, Fluo-4 AM 或FluoForteÔ AM在HHBS中,37°C, 5% CO2孵育箱内孵育1小时。然后用200ul HHBS洗涤两次,加入ATP(20ul/孔),使dye efflux inhibitor抑制剂终浓度为100nM,然后立即用荧光显微镜(FITC荧光通道检测)成像。
 
产品信息:
产品名称
产品编号
规格
保存条件
试剂盒组成
运输条件
报价
FluoForteTM Calcium Assay Kit
ENZ-51016
 
1 kit
100 plates
短期:-20°C
长期:-80°C
避光,无反复冻融
冻干FluoForteTM染料:10 vials
dye efflux inhibitor抑制剂:10 X 10ml
干冰运输
请询
 
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